සෛල සංස්කෘතිය පරිසරය සෛල නිෂ්පාදනයට බලපායි

සෛල සංස්කෘතියේ එක් ප්‍රධාන වාසියක් වන්නේ සෛල ප්‍රජනනය (එනම් උෂ්ණත්වය, pH අගය, ඔස්මොටික් පීඩනය, O2 සහ CO2 ආතතිය) සහ භෞතික විද්‍යාත්මක පරිසරය (එනම් හෝමෝන සහ පෝෂක සාන්ද්‍රණය) භෞතික රසායනය හැසිරවීමේ හැකියාවයි.උෂ්ණත්වයට අමතරව, සංස්කෘතික පරිසරය වර්ධන මාධ්යය මගින් පාලනය වේ.

සංස්කෘතියේ භෞතික විද්‍යාත්මක පරිසරය එහි භෞතික හා රසායනික පරිසරය තරම් පැහැදිලි නැතත්, සෙරුමය සංරචක පිළිබඳ වඩා හොඳ අවබෝධයක්, ව්‍යාප්තිය සඳහා අවශ්‍ය වර්ධන සාධක හඳුනා ගැනීම සහ සංස්කෘතියේ සෛලවල ක්ෂුද්‍ර පරිසරය පිළිබඳ වඩා හොඳ අවබෝධයක්.(එනම් සෛල-සෛල අන්තර්ක්‍රියා, වායු විසරණය, න්‍යාසය සමඟ අන්තර්ක්‍රියා) දැන් සමහර සෛල රේඛා සෙරුමය-නිදහස් මාධ්‍ය තුළ වගා කිරීමට ඉඩ සලසයි.

1.සංස්කෘතික පරිසරය සෛල වර්ධනයට බලපායි
එක් එක් සෛල වර්ගය සඳහා සෛල සංස්කෘතියේ කොන්දේසි වෙනස් බව කරුණාවෙන් සලකන්න.
විශේෂිත සෛල වර්ගයක් සඳහා අවශ්‍ය සංස්කෘතික තත්වයන්ගෙන් බැහැරවීමේ ප්‍රතිවිපාක අසාමාන්‍ය ෆීනෝටයිප් ප්‍රකාශනයේ සිට සෛල සංස්කෘතියේ සම්පූර්ණ අසාර්ථකත්වය දක්වා විහිදේ.එමනිසා, ඔබ උනන්දුවක් දක්වන සෛල රේඛාව සමඟ ඔබ හුරුපුරුදු වන ලෙසත්, ඔබේ අත්හදා බැලීමේදී ඔබ භාවිතා කරන සෑම නිෂ්පාදනයක් සඳහාම ලබා දී ඇති උපදෙස් දැඩි ලෙස අනුගමනය කරන ලෙසත් අපි නිර්දේශ කරමු.

2. ඔබේ සෛල සඳහා ප්‍රශස්ත සෛල සංස්කෘතික පරිසරයක් නිර්මාණය කිරීම සඳහා පූර්වාරක්ෂාව:
සංස්කෘතික මාධ්‍ය සහ සෙරුමය (වැඩිදුර තොරතුරු සඳහා පහත බලන්න)
pH සහ CO2 මට්ටම් (වැඩිදුර තොරතුරු සඳහා පහත බලන්න)
ප්ලාස්ටික් වගා කරන්න (වැඩිදුර තොරතුරු සඳහා පහත බලන්න)
උෂ්ණත්වය (වැඩිදුර තොරතුරු සඳහා පහත බලන්න)

2.1 සංස්කෘතික මාධ්‍ය සහ සෙරුමය
සංස්කෘතික මාධ්‍යය සංස්කෘතික පරිසරයේ වැදගත්ම කොටස වන අතර, එය සෛල වර්ධනයට අවශ්‍ය පෝෂ්‍ය පදාර්ථ, වර්ධන සාධක සහ හෝමෝන සපයන අතර සංස්කෘතියේ pH අගය සහ ඔස්මොටික් පීඩනය නියාමනය කරයි.

පටක සාරය සහ ශරීර තරල වලින් ලබාගත් ස්වභාවික මාධ්‍ය භාවිතයෙන් මූලික සෛල සංස්කෘතික පරීක්ෂණ සිදු කළද, ප්‍රමිතිකරණයේ අවශ්‍යතාවය, මාධ්‍ය ගුණාත්මක භාවය සහ ඉල්ලුම වැඩි වීම නිශ්චිත මාධ්‍ය වර්ධනයට හේතු විය.මූලික මාධ්‍ය වර්ග තුන වන්නේ බාසල් මාධ්‍ය, අඩු කළ සෙරුමය මාධ්‍ය සහ සෙරුමය-නිදහස් මාධ්‍ය වන අතර, ඒවාට සෙරුමය අතිරේකය සඳහා විවිධ අවශ්‍යතා ඇත.

2.1.1 මූලික මාධ්යය
Gibco සෛල සංස්කෘතික මාධ්යය
බොහෝ සෛල රේඛා ඇමයිනෝ අම්ල, විටමින්, අකාබනික ලවණ සහ කාබන් ප්‍රභවයන් (ග්ලූකෝස් වැනි) අඩංගු මූලික මාධ්‍යවල හොඳින් වර්ධනය වේ, නමුත් මෙම මූලික මාධ්‍ය සූත්‍ර සෙරුමය සමඟ අතිරේක කළ යුතුය.

2.1.2 සෙරුම මාධ්‍යය අඩු කිරීම
Gibco Low Serum Medium සහිත බෝතලය
සෛල සංස්කෘතික අත්හදා බැලීම් වලදී සෙරුමයේ අහිතකර බලපෑම් අවම කිරීම සඳහා තවත් උපාය මාර්ගයක් වන්නේ සෙරුමය අඩු කරන ලද මාධ්‍ය භාවිතා කිරීමයි.අඩු කළ සෙරුමය මාධ්‍යය යනු පෝෂ්‍ය පදාර්ථ සහ සත්ව-ව්‍යුත්පන්න සාධක වලින් පොහොසත් මූලික මාධ්‍ය සූත්‍රයක් වන අතර එමඟින් අවශ්‍ය සෙරුමය ප්‍රමාණය අඩු කළ හැකිය.

2.1.3 සෙරුමය-නිදහස් මාධ්‍යය
Gibco serum-free media සහිත බෝතලය
මස්තු රහිත මාධ්‍යය (SFM) සුදුසු පෝෂණය සහ හෝමෝන සංයෝග සමඟ සෙරුමය ප්‍රතිස්ථාපනය කිරීමෙන් සත්ව සෙරුමය භාවිතය මග හරියි.බොහෝ ප්‍රාථමික සංස්කෘතීන් සහ සෛල රේඛා වල, චීන හැම්ස්ටර් ඩිම්බකෝෂය (CHO) ප්‍රතිසංයෝජක ප්‍රෝටීන් නිෂ්පාදන රේඛාව, විවිධ දෙමුහුන් සෛල රේඛා, කෘමි රේඛා Sf9 සහ Sf21 (Spodoptera frugiperda) මෙන්ම වෛරස් නිෂ්පාදනය සඳහා සත්කාරක සඳහා ද සෙරුමය-නිදහස් මධ්‍යම සංයෝග ඇත. (උදාහරණයක් ලෙස, 293, VERO, MDCK, MDBK), ආදිය. සෙරුමය-නිදහස් මාධ්‍යයක් භාවිතා කිරීමේ එක් ප්‍රධාන වාසියක් වන්නේ වර්ධන සාධකවල උචිත සංයෝගයක් තෝරා ගැනීමෙන් නිශ්චිත සෛල වර්ග සඳහා මාධ්‍යය තෝරා ගැනීමේ හැකියාවයි.සෙරුමය රහිත මාධ්‍යයේ වාසි සහ අවාසි පහත වගුවේ දක්වා ඇත.

වාසිය
පැහැදිලි බව වැඩි කරන්න
වඩාත් ස්ථාවර කාර්ය සාධනය
පහසු පිරිසිදු කිරීම සහ පහළට සැකසීම
සෛල ක්‍රියාකාරිත්වය නිවැරදිව තක්සේරු කරන්න
ඵලදායිතාව වැඩි කරන්න
කායික ප්රතික්රියා වඩා හොඳින් පාලනය කිරීම
වැඩිදියුණු කළ සෛල මාධ්‍ය හඳුනාගැනීම
අවාසිය
සෛල වර්ගය විශේෂිත මධ්‍යම සූත්‍ර අවශ්‍යතා
ඉහළ ප්රතික්රියාකාරක සංශුද්ධතාවයක් අවශ්ය වේ
වර්ධනය මන්දගාමී වීම

2.2.1 pH මට්ටම
බොහෝ සාමාන්‍ය ක්ෂීරපායී සෛල රේඛා pH අගය 7.4 දී හොඳින් වර්ධනය වන අතර විවිධ සෛල රේඛා අතර වෙනස්කම් කුඩා වේ.කෙසේ වෙතත්, සමහර පරිණාමනය වූ සෛල රේඛා තරමක් ආම්ලික පරිසරයක (pH 7.0 - 7.4) වඩා හොඳින් වර්ධනය වන බව පෙන්වා දී ඇති අතර, සමහර සාමාන්‍ය ෆයිබ්‍රොබ්ලාස්ට් සෛල රේඛා තරමක් ක්ෂාරීය පරිසරයකට (pH 7.4 - 7.7) කැමති වේ.Sf9 සහ Sf21 වැනි කෘමි සෛල රේඛා pH 6.2 දී හොඳින් වර්ධනය වේ.

2.2.2 CO2 මට්ටම
වර්ධන මාධ්‍යය සංස්කෘතියේ pH අගය පාලනය කරන අතර pH හි වෙනස්වීම් වලට ප්‍රතිරෝධය දැක්වීම සඳහා සංස්කෘතියේ සෛල බෆර් කරයි.සාමාන්‍යයෙන්, කාබනික (උදාහරණයක් ලෙස, HEPES) හෝ CO2-බයිකාබනේට් මත පදනම් වූ බෆර අඩංගු වීමෙන් මෙම බෆරය ලබා ගත හැක.මාධ්‍යයේ pH අගය ද්‍රාවිත කාබන් ඩයොක්සයිඩ් (CO2) සහ බයිකාබනේට් (HCO3-) හි සියුම් ශේෂය මත රඳා පවතින බැවින්, වායුගෝලීය CO2 හි වෙනස්වීම් මාධ්‍යයේ pH අගය වෙනස් කරයි.එබැවින්, CO2-බයිකාබනේට් මත පදනම් වූ බෆරයක් සහිත මාධ්‍යයක් භාවිතා කරන විට, බාහිර CO2 භාවිතා කිරීම අවශ්‍ය වේ.බොහෝ පර්යේෂකයන් සාමාන්‍යයෙන් වාතයේ 5-7% CO2 භාවිතා කළද, බොහෝ සෛල සංස්කෘතික පරීක්ෂණ සාමාන්‍යයෙන් 4-10% CO2 භාවිතා කරයි.කෙසේ වෙතත්, නිවැරදි pH අගය සහ ඔස්මොටික් පීඩනය ලබා ගැනීම සඳහා සෑම මාධ්‍යයකටම නිර්දේශිත CO2 ආතතියක් සහ බයිකාබනේට් සාන්ද්‍රණයක් ඇත;වැඩි විස්තර සඳහා කරුණාකර මධ්‍යම නිෂ්පාදකයාගේ උපදෙස් බලන්න.

2.3 ප්ලාස්ටික් වගා කිරීම
සෛල සංස්කෘතික ප්ලාස්ටික් විවිධ සෛල සංස්කෘතික යෙදුම් වලට ගැලපෙන පරිදි විවිධ ආකාරවලින්, ප්‍රමාණවලින් සහ මතුපිටින් ලබා ගත හැකිය.ඔබේ සෛල සංස්කෘතික යෙදුම සඳහා නිවැරදි ප්ලාස්ටික් තෝරා ගැනීමට උපකාර කිරීමට පහත සෛල සංස්කෘතිය ප්ලාස්ටික් මතුපිට මාර්ගෝපදේශය සහ සෛල සංස්කෘතික බහාලුම් මාර්ගෝපදේශය භාවිතා කරන්න.
සියලුම Thermo Scientific Nunc Cell Culture ප්ලාස්ටික් බලන්න (ප්‍රචාරණ සබැඳිය)

2.4 උෂ්ණත්වය
සෛල සංස්කෘතිය සඳහා ප්‍රශස්ත උෂ්ණත්වය බොහෝ දුරට සෛල හුදකලා වී ඇති ධාරකයාගේ ශරීර උෂ්ණත්වය මත රඳා පවතී, සහ උෂ්ණත්වයේ ව්‍යුහ විද්‍යාත්මක වෙනස්කම් මත (උදාහරණයක් ලෙස, සමේ උෂ්ණත්වය අස්ථි මාංශ පේශිවලට වඩා අඩු විය හැක. )සෛල සංස්කෘතිය සඳහා, අධික උනුසුම් වීම අධික උනුසුම් වීමට වඩා බරපතල ගැටළුවකි.එමනිසා, ඉන්කියුබේටරයේ උෂ්ණත්වය සාමාන්යයෙන් ප්රශස්ථ උෂ්ණත්වයට වඩා තරමක් පහළින් පිහිටුවා ඇත.

2.4.1 විවිධ සෛල රේඛා සඳහා ප්‍රශස්ත උෂ්ණත්වය
බොහෝ මානව සහ ක්ෂීරපායී සෛල රේඛා ප්‍රශස්ත වර්ධනය සඳහා 36°C සිට 37°C දක්වා තබා ඇත.
ප්රශස්ත වර්ධනය සඳහා කෘමි සෛල 27 ° C දී වගා කෙරේ;අඩු උෂ්ණත්වවලදී සහ 27 ° C සහ 30 ° C අතර උෂ්ණත්වයකදී ඒවා වඩා සෙමින් වර්ධනය වේ.සෙල්සියස් අංශක 30 ට වැඩි නම්, කෘමි සෛලවල ජීව ශක්තිය අඩු වේ, එය නැවත 27 ° C දක්වා ගියත්, සෛල යථා තත්ත්වයට පත් නොවනු ඇත.
කුරුළු සෛල රේඛා උපරිම වර්ධනයට ළඟා වීමට 38.5 ° C අවශ්ය වේ.මෙම සෛල 37 ° C දී තබා ගත හැකි වුවද, ඒවා වඩා සෙමින් වර්ධනය වේ.
සීතල-ලේ සහිත සතුන්ගෙන් (උභයජීවීන්, සීතල ජල මාළු වැනි) ලබාගත් සෛල රේඛා 15 ° C සිට 26 ° C දක්වා පුළුල් උෂ්ණත්ව පරාසයක් දරාගත හැකිය.