සෛල සංස්කෘතිය දූෂණය ඵලදායී ලෙස අඩු කරන ලදී

සෛල සංස්කෘතීන් දූෂණය වීම සෛල සංස්කෘතික රසායනාගාරවල වඩාත් පොදු ගැටළුව බවට පත් විය හැකි අතර සමහර විට ඉතා බරපතල ප්රතිවිපාක ඇති කරයි.සෛල සංස්කෘතික අපවිත්‍ර ද්‍රව්‍ය කාණ්ඩ දෙකකට බෙදිය හැකිය, මධ්‍යම, සෙරුමය සහ ජල අපද්‍රව්‍ය, එන්ඩොටොක්සින්, ප්ලාස්ටිසයිසර් සහ ඩිටර්ජන්ට් වැනි රසායනික දූෂක සහ බැක්ටීරියා, අච්චු, යීස්ට්, වෛරස්, මයිකොප්ලාස්මා හරස් ආසාදනය වැනි ජීව විද්‍යාත්මක දූෂක.වෙනත් සෛල රේඛා මගින් දූෂිත වේ.දූෂණය සම්පූර්ණයෙන්ම තුරන් කළ නොහැකි වුවද, එහි ප්‍රභවය හොඳින් අවබෝධ කර ගැනීමෙන් සහ හොඳ අසප්ටික් ශිල්පීය ක්‍රම අනුගමනය කිරීමෙන් එහි සංඛ්‍යාතය සහ බරපතලකම අඩු කළ හැකිය.

1.මෙම කොටස ජීව විද්‍යාත්මක දූෂණයේ ප්‍රධාන වර්ග දක්වයි:
බැක්ටීරියා දූෂණය
පුස් සහ වෛරස් දූෂණය
මයිකොප්ලාස්මා දූෂණය
යීස්ට් දූෂණය

1.1 බැක්ටීරියා දූෂණය
බැක්ටීරියා යනු සෑම තැනකම ඇති ඒක සෛලීය ක්ෂුද්‍ර ජීවීන්ගේ විශාල සමූහයකි.ඒවා සාමාන්‍යයෙන් මයික්‍රෝන කිහිපයක් විශ්කම්භයෙන් යුක්ත වන අතර ගෝලයේ සිට දඬු සහ සර්පිලාකාර දක්වා විවිධ හැඩයන්ගෙන් පැමිණිය හැක.ඔවුන්ගේ සර්වසම්පූර්ණත්වය, ප්‍රමාණය සහ වේගවත් වර්ධන වේගය නිසා බැක්ටීරියා, යීස්ට් සහ අච්චු සමඟ සෛල සංස්කෘතියේ වඩාත් සුලභ ජීව විද්‍යාත්මක දූෂක වේ.

1.1.1 බැක්ටීරියා දූෂණය හඳුනා ගැනීම
ආසාදනය වී දින කිහිපයක් ඇතුළත සංස්කෘතියේ දෘශ්‍ය පරීක්ෂාව මගින් බැක්ටීරියා දූෂණය පහසුවෙන් හඳුනාගත හැකිය;
ආසාදිත සංස්කෘතීන් සාමාන්‍යයෙන් වලාකුළු සහිත (එනම්, කැළඹිලි සහිත), සමහර විට තුනී පටලයක් මතුපිටින් දිස්වේ.
සංස්කෘතික මාධ්‍යයේ pH අගයෙහි හදිසි පහත වැටීම් ද නිතර දක්නට ලැබේ.
අඩු බලැති අන්වීක්ෂයක් යටතේ, බැක්ටීරියා සෛල අතර කුඩා, චලනය වන කැටිති ලෙස දිස්වන අතර අධි බලැති අන්වීක්ෂයක් යටතේ නිරීක්ෂණය කිරීමෙන් තනි බැක්ටීරියා වල හැඩය විසඳිය හැකිය.

1.2 පුස් සහ වෛරස් දූෂණය
1.2.1 අච්චු දූෂණය
අච්චු යනු හයිෆේ නම් බහු සෛලීය සූතිකා ස්වරූපයෙන් වර්ධනය වන දිලීර රාජධානියේ යුකැරියෝටික් ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් වේ.මෙම බහු සෛලීය සූතිකා වල සම්බන්ධක ජාලයන් යටත් විජිත හෝ mycelium ලෙස හඳුන්වන ජානමය වශයෙන් සමාන න්යෂ්ටි අඩංගු වේ.

යීස්ට් දූෂණයට සමානව, දූෂණයේ ආරම්භක අවධියේදී සංස්කෘතියේ pH අගය ස්ථායීව පවතින අතර පසුව සංස්කෘතිය වඩාත් දරුණු ලෙස ආසාදනය වී වළාකුළු බවට පත්වන විට වේගයෙන් වැඩිවේ.අන්වීක්ෂය යටතේ, mycelium සාමාන්යයෙන් සූතිකාමය වේ, සමහර විට බීජාණු ඝන පොකුරු ලෙස.බොහෝ අච්චු වල බීජාණු ඔවුන්ගේ නිද්‍රාශීලී අවධියේදී අතිශය රළු සහ ආගන්තුක පරිසරයක පැවතිය හැකි අතර සක්‍රීය වන්නේ නිවැරදි වර්ධන තත්ත්වයන් හමු වූ විට පමණි.

1.2.2 වෛරස් දූෂණය
වෛරස් යනු ප්‍රජනනය සඳහා ධාරක සෛල යන්ත්‍ර සූත්‍ර භාර ගන්නා අන්වීක්ෂීය ආසාදන කාරක වේ.ඒවායේ ඉතා කුඩා ප්‍රමාණයෙන් ඒවා සංස්කෘතිය තුළ හඳුනා ගැනීම සහ සෛල සංස්කෘතික රසායනාගාරවල භාවිතා කරන ප්‍රතික්‍රියාකාරක වලින් ඉවත් කිරීම දුෂ්කර කරයි.බොහෝ වෛරස් වලට ඔවුන්ගේ ධාරක සඳහා ඉතා දැඩි අවශ්‍යතා ඇති බැවින්, ඒවා සාමාන්‍යයෙන් ධාරක හැර අනෙකුත් විශේෂවල සෛල සංස්කෘතීන්ට අහිතකර ලෙස බලපාන්නේ නැත.
කෙසේ වෙතත්, වෛරස් ආසාදිත සෛල සංස්කෘතීන් භාවිතා කිරීම රසායනාගාර සේවකයින්ගේ සෞඛ්‍යයට බරපතල අවදානමක් ඇති කළ හැකිය, විශේෂයෙන් මිනිස් හෝ ප්‍රයිමේට් සෛල රසායනාගාරයේ වගා කරන්නේ නම්.

සෛල සංස්කෘතීන්හි වෛරස් ආසාදනය ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය, ප්‍රතිදේහ කට්ටලයක් සමඟ ප්‍රතිශක්තිකරණය, ELISA හෝ PCR සුදුසු වෛරස් ප්‍රයිමර් සමඟ හඳුනාගත හැකිය.

1.3 මයිකොප්ලාස්මා දූෂණය
මයිකොප්ලාස්මා යනු සෛල බිත්ති නොමැති සරල බැක්ටීරියා වන අතර ඒවා කුඩාම ස්වයං-ප්‍රතිනිර්මාණ ජීවීන් ලෙස සැලකේ.ඒවායේ අතිශය කුඩා ප්‍රමාණය (සාමාන්‍යයෙන් මයික්‍රෝන 1 ට වඩා අඩු) නිසා, මයිකොප්ලාස්මා අතිශයින් ඉහළ ඝනත්වයකට ළඟා වන තෙක් සහ සෛල සංස්කෘතීන් පිරිහීමට හේතු වන තෙක් හඳුනා ගැනීමට අපහසු වේ;එතෙක්, සාමාන්යයෙන් ආසාදනය පිළිබඳ පැහැදිලි සලකුණක් නොමැත.

1.3.1 මයිකොප්ලාස්මා දූෂණය හඳුනා ගැනීම
සමහර සෙමින් වර්ධනය වන මයිකොප්ලාස්මා සෛල මරණයට හේතු නොවී සංස්කෘතීන් තුළ පැවතිය හැක, නමුත් ඒවා සංස්කෘතීන්හි ධාරක සෛලවල හැසිරීම සහ පරිවෘත්තීය වෙනස් කරයි.

නිදන්ගත මයිකොප්ලාස්මා ආසාදනය අඩු වූ සෛල ව්‍යාප්ති අනුපාතය, සංතෘප්ත ඝනත්වය අඩු වීම සහ අත්හිටුවීමේ සංස්කෘතියේ එකතු වීම මගින් සංලක්ෂිත විය හැක.
කෙසේ වෙතත්, මයිකොප්ලාස්මා දූෂණය හඳුනා ගැනීමට ඇති එකම විශ්වාසදායක ක්‍රමය වන්නේ ප්‍රතිදීප්ත පැල්ලම් (උදා: Hoechst 33258), ELISA, PCR, ප්‍රතිශක්තිකරණය, ස්වයංක්‍රීය විකිරණ හෝ ක්ෂුද්‍රජීවී පරීක්ෂණ භාවිතයෙන් සංස්කෘතිය නිතිපතා පරීක්ෂා කිරීමයි.

1.4 යීස්ට් දූෂණය
යීස්ට් යනු දිලීර රාජධානියේ ඒක සෛලික යුකැරියෝට් වන අතර, මයික්‍රෝන කිහිපයක (සාමාන්‍යයෙන්) සිට මයික්‍රෝන 40 (කලාතුරකින්) ප්‍රමාණයෙන් යුක්ත වේ.

1.4.1 යීස්ට් දූෂණය හඳුනා ගැනීම
බැක්ටීරියා දූෂණය මෙන්ම, යීස්ට් වලින් දූෂිත වූ සංස්කෘතීන් වලාකුළු බවට පත් විය හැක, විශේෂයෙන් දූෂණය දියුණු අවධියක පවතී නම්.යීස්ට් වලින් දූෂිත වූ සංස්කෘතීන්ගේ pH අගය දූෂණය වඩාත් දරුණු වන තෙක් ඉතා සුළු වශයෙන් වෙනස් වේ, එම අවධියේදී pH අගය සාමාන්‍යයෙන් වැඩි වේ.අන්වීක්ෂය යටතේ, යීස්ට් තනි ඩිම්බකෝෂ හෝ ගෝලාකාර අංශු ලෙස පෙනෙන අතර කුඩා අංශු නිපදවිය හැක.

2.හරස් ආසාදනය
ක්ෂුද්‍රජීවී දූෂණය තරම් සුලභ නොවූවත්, HeLa සහ අනෙකුත් වේගයෙන් වර්ධනය වන සෛල රේඛා සමඟ බොහෝ සෛල රේඛා පුළුල් ලෙස හරස් දූෂණය වීම බරපතල ප්‍රතිවිපාක සහිත පැහැදිලිව අර්ථ දක්වා ඇති ගැටලුවකි.පිළිගත් සෛල බැංකු වලින් සෛල රේඛා ලබා ගන්න, සෛල රේඛාවල ලක්ෂණ නිතිපතා පරීක්ෂා කරන්න, සහ හොඳ aseptic තාක්ෂණික ක්රම භාවිතා කරන්න.මෙම පිළිවෙත් ඔබට හරස් දූෂණය වළක්වා ගැනීමට උපකාරී වනු ඇත.DNA ඇඟිලි සලකුණු, karyotyping සහ isotyping මඟින් ඔබේ සෛල සංස්කෘතියේ හරස් දූෂණයක් තිබේද යන්න තහවුරු කළ හැක.

ක්ෂුද්‍රජීවී දූෂණය තරම් සුලභ නොවූවත්, HeLa සහ අනෙකුත් වේගයෙන් වර්ධනය වන සෛල රේඛා සමඟ බොහෝ සෛල රේඛා පුළුල් ලෙස හරස් දූෂණය වීම බරපතල ප්‍රතිවිපාක සහිත පැහැදිලිව අර්ථ දක්වා ඇති ගැටලුවකි.පිළිගත් සෛල බැංකු වලින් සෛල රේඛා ලබා ගන්න, සෛල රේඛාවල ලක්ෂණ නිතිපතා පරීක්ෂා කරන්න, සහ හොඳ aseptic තාක්ෂණික ක්රම භාවිතා කරන්න.මෙම පිළිවෙත් ඔබට හරස් දූෂණය වළක්වා ගැනීමට උපකාරී වනු ඇත.DNA ඇඟිලි සලකුණු, karyotyping සහ isotyping මඟින් ඔබේ සෛල සංස්කෘතියේ හරස් දූෂණයක් තිබේද යන්න තහවුරු කළ හැක.